液氮保藏法

點擊次數:   更新時間:18/09/26 09:44:09     來源:www.fuydun.com關閉分    享:
  液氮保藏法,亦稱超低溫保藏法。主要利用微生物在低于-130°C的低溫下新陳代謝趨于停止的原理,在液氮中(-196°C的超低溫下)有效地進行菌種保藏的方法。此法操作簡便、高效,保藏期一般可達到15年以上,是目前公認的菌種長期保藏技術之一,并且適用于各類微生物菌種的保藏。
  但是,采用液氮保藏,需購置超低溫液氮設備,且液氮消耗量大,費用高。液氮低溫保藏的保護劑,一般選擇甘油、二甲基亞砜、糊精、血清蛋白、聚乙烯氮戊環、吐溫80等,常用的是甘油(10%?20%),不同微生物應選擇不同的保護劑,保護劑的濃度應控制在不造成微生物死亡為宜。
  操作方法:
  把微生物細胞混懸于含保護劑(20%甘油,10%DMSO等)的液體培養基中(也可把含菌瓊脂塊直接浸入含保護劑的培養液中),分裝入耐低溫的安瓿瓶中后,作緩慢預冷,然后移至液氮罐中的液相(-196℃)或氣相(-156℃)作長期超低溫保藏。
  操作原則:
  “慢凍快溶”。
  原理:
  利用微生物在-130℃以下新陳代謝趨于停止而有效地保藏微生物。
  0.5mol/L左右的甘油或二甲亞砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)可透入細胞,并通過降低強烈的脫水作用而保護細胞。
  保藏期長(15年以上),且適合保藏各類微生物,尤其適宜于保存難以用冷凍干燥保藏法保藏的微生物,如支原體、衣原體、不產孢子的真菌、微藻和原生動物等。
小編:Qian
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